Taq polimeráz Az organizmusban a DNS-replikációhoz hasonlóan a PCR-hez is olyan DNS-polimeráz enzimre van szükség, amely új DNS-szálakat hoz létre, a meglévő szálakat templátként felhasználva. A PCR-ben általában használt DNS-polimerázt Taq polimeráznak nevezik, a hőtűrő baktérium után, amelyből izolálták (Thermus aquaticus).
Miért van szükség hőstabil DNS-polimerázra a PCR-hez?
Az
aquaticus egy baktérium, amely meleg forrásokban és hidrotermális nyílásokban él, és a Taq polimerázt enzimként azonosították, amely képes ellenállni a fehérjedenaturáló körülményeknek (magas hőmérséklet) PCR.
Melyik lépést alkalmazza a PCR hőstabil enzim?
A hőstabil DNS-polimerázt ismételt primer-illesztési ciklusokban, DNS-szintézisben és a duplex DNS disszociációjában használnak új templátként. A templát DNS elméleti amplifikációja, feltéve, hogy a reagensek nem korlátozóak, és az enzim fenntartja teljes aktivitását, 2 ahol n a ciklusok száma.
A PCR enzimek mely lépéseiben használnak?
A PCR három lépése─denaturáció, annealing és extenzió─amint az az első ciklusban látható, és a cél DNS exponenciális amplifikációja ismételt ciklussal.
Melyik enzimet használják a PCR-ben történő amplifikációhoz?
A Taq DNS polimeráz általánosan használt 5 kb vagy kisebb méretű PCR termékek amplifikálására. Az 5–10 kb-os PCR-termékek amplifikálhatók Taq DNS-polimerázzal, de gyakran több optimalizálást igényelnek, mint a kisebb PCR-termékek.